Los anfibios exhiben mecanismos de termorregulación poco eficientes. Estudios poblacionales en el anuro Rhinella spinulosa han examinado la diferenciación en los rasgos genéticos, morfológicos y de historia de vida, reportándose diferencias significativas a lo largo de su distribución geográfica. En Chile, una de estas poblaciones habita en arroyos geotérmicos (géiseres de El Tatio), un ambiente único y poco común para un anfibio. A la fecha, ningún estudio ha sugerido algún mecanismo genético-molecular detrás de tales respuestas adaptativas. Por lo tanto, el objetivo de este trabajo fue caracterizar los niveles de expresión de los genes hsph1, hsp90ab1 y trpv2, en individuos pro-metamórficos y metamórficos de R. spinulosa provenientes de El Tatio y Catarpe, los cuales fueron expuestos a un tratamiento térmico contrastante. La metodología contempló la extracción de RNA total y síntesis de ss-cDNA para muestras de dos estadios de desarrollo específicos de R. spinulosa, previamente expuestos a dos regímenes térmicos (20 y 25 °C). Se llevó a cabo el diseño y síntesis de oligo-partidores específicos para los genes hsph1, hsp90ab1 y trpv2, así como un análisis semi-cuantitativo de la expresión genética de éstos a través de ensayos de RT-PCR. Los resultados mostraron una baja expresión de los genes analizados en las muestras de los especímenes en estadio Gosner 42 con tratamiento térmico de 20 °C de El Tatio, en contraste con las muestras de Catarpe bajo las mismas condiciones experimentales. En conclusión, se logró identificar y analizar exitosamente los niveles de expresión de dos (hsph1 y trpv2) de los tres genes candidatos para las muestras biológicas procedentes de las dos poblaciones de R. spinulosa, las cuales habitan ambientes térmicamente disímiles.